High sugar content interferes with colorimetric determination of amino acids and free proline

Resumo

Teores de açúcares foram avaliados por se correlacionar com as determinações de nitrogênio α-amino e prolina livre com ninidrina. Modificações adequadas são propostas para a análise quantitativa desses compostos na presença de grandes quantidades de carboidratos. Nesse novo método de dosagem de prolina, o aprimoramento consiste em usar um tampão citrato ajustado para pH 4,6. A prolina livre é analisada pelo reagente de ninidrina preparado sem ácido fosfórico. Este último procedimento usa menos ninidrina e parece ser simplificado em comparação com o método comumente usado. Ambos os procedimentos permitem uma determinação simples, sensível e específica de compostos nitrogenados em extratos brutos. A eliminação da interferência de carboidratos torna nosso procedimento aplicável a extratos brutos de vários produtos alimentícios, como frutas e plantas, que acumulam carboidratos solúveis.

Abstract

Sugars were found to interfere with the determinations of α-amino nitrogen and free proline with ninhydrin. Suitable modifications are proposed for the quantitative analysis of these compounds in the presence of large amounts of carbohydrates. In this new method of proline assay, the improvement consits of using a citrate buffer adjusted to pH 4.6. Free proline is assayed by ninhydrin reagent prepared without phosphoric acid. This latter procedure uses less ninhydrin and appears to be simplified in comparison with the commonly used method. Both procedures permit a simple, sensitive, and specific determination of nitrogenous compounds in crude extracts. Elimination of carbohydrate interference makes our procedure applicable to crude extracts from various food products such as fruits and plants that accumulate soluble carbohydrates.