Isolation and characterisation of phosphate solubilising microorganisms from the cold desert habitat of Salix alba Linn. in trans Himalayan region of Himachal Pradesh

Resumo

Os microrganismos solubilizadores de fosfato (MSP) (bactérias e fungos) associados à Salix alba Linn. dos vales de Lahaul e Spiti, em Himachal Pradesh, foram isolados em meios de Pikovskaya (PVK), Pikovskaya modificado (MPVK) e ágar do National Botanical Research Institute (NBRIP) por meio de plaqueamento. A contagem de colônias viáveis de bactérias solubilizadoras de P (BSP) e fungos (FSP) foi maior na rizosfera do que na não rizosfera. A frequência de MSP foi maior no ágar MPVK, seguido pelo ágar NBRIP e PVK. A proporção máxima de MSP em relação à contagem total de bactérias e fungos foi encontrada na parte superior de Keylong e a menor em Rong Tong. As BSP eram frequentemente bastonetes Gram-positivos, endospóricos, móveis e pertenciam a Bacillus sp. Os FSP pertenciam principalmente a Penicillium sp., Aspergillus fumigatus, A. niger, A. spp. e estéreis não esporulados. Entre os isolados com alta eficiência para a solubilização de fosfato tricálcico (TCP), sete isolados bacterianos e sete fúngicos dissolveram maior quantidade de P da rocha fosfática da Carolina do Norte (NCRP) do que a rocha fosfática de Mussoorie (MRP) e a rocha fosfática de Udaipur (URP). No entanto, os organismos solubilizaram mais P no caldo NBRIP do que no caldo PVK. Os isolados bacterianos SBC5 (Bacillus sp.) e SBC7 (Bacillus sp.) exibiram solubilização máxima de P (40 e 33 μg ml-1, respectivamente), enquanto o isolado FC28 (Penicillium sp.) (52,3 μg ml-1) entre os fungos solubilizou o URP. A quantidade de P solubilizada foi positivamente correlacionada com a diminuição do pH do meio. Os isolados de fungos SBC5 (Bacillus sp.), SBC7 (Bacillus sp.) e SBC4 (Micrococcus) diminuíram o pH do meio de 6,8 para 6,08, enquanto os isolados de fungos FC28 (Penicillium sp.) e FC39 (Penicillium sp.) registraram a diminuição máxima do pH do meio de 6,8 para 5,96 no caldo NBRIP.

Abstract

Phosphate solubilising microorganisms (PSM) (bacteria and fungi) associated with Salix alba Linn. from Lahaul and Spiti valleys of Himachal Pradesh were isolated on Pikovskaya (PVK), modified Pikovskaya (MPVK) and National Botanical Research Institute agar (NBRIP) media by spread plating. The viable colony count of P-solubilising bacteria (PSB) and fungi (PSF) was higher in rhizosphere than that of non-rhizosphere. The frequency of PSM was highest on MPVK followed by NBRIP and PVK agar. The maximum proportion of PSM out of total bacterial and fungal count was found in upper Keylong while the least in Rong Tong. The PSB frequently were Gram-positive, endosporeforming, motile rods and belonged to Bacillus sp. The PSF mainly belonged to Penicillium sp., Aspergillus fumigatus, A. niger, A. spp. and non-sporulating sterile. Amongst the isolates with high efficiency for tricalcium phosphate (TCP) solubilisation, seven bacterial and seven fungal isolates dissolved higher amount of P from North Carolina rock phosphate (NCRP) than Mussoorie rock phosphate (MRP) and Udaipur rock phosphate (URP). However, the organisms solubilised higher-P in NBRIP broth than PVK broth. SBC5 (Bacillus sp.) and SBC7 (Bacillus sp.) bacterial isolates exhibited maximun P solubilisation (40 and 33 μg ml⁻¹ respectively) whereas FC28 (Penicillium sp.) isolate (52.3 μg ml⁻¹) amongst fungi while solubilising URP. The amount of P solubilised was positively correlated with the decrease in pH of medium. SBC5 (Bacillus sp.), SBC7 (Bacillus sp.) and SBC4 (Micrococcus) decreased the pH of medium from 6.8 to 6.08 while FC28 (Penicillium sp.) and FC39 (Penicillium sp.) isolates of fungi recorded maximum decrease in pH of medium from 6.8 to 5.96 in NBRIP broth.